ADN Recombinante en la Naturaleza

La recombinación genética es un proceso biológico que se produce normalmente en todos los organismos, tras el cual se produce un cambio del genoma (patrimonio genético del que está dotado un organismo) y se verifica normalmente con la rotura y la reunión del ADN.

La recombinación de eucariotas comúnmente se produce durante la meiosis como entrecruzamiento cromosómico entre los cromosomas apareados. Este proceso conduce a que la progenie tenga diferentes combinaciones de genes de sus padres y puede producir alelos quiméricos. En biología evolutiva se cree que esta mezcla de genes tiene varias ventajas, incluyendo que permite a los organismos que se reproducen sexualmente. En biología molecular,"recombinación" también se refiere a la recombinación artificial y deliberada de piezas de ADN distintas, a menudo de diferentes organismos, creando lo que se llama ADN recombinante.

Enzimas llamadas recombinasas catalizan las reacciones de recombinación natural. RecA, la recombinasa encontrada en Escherichia coli, es responsable de la reparación de las roturas en el ADN de doble hebra. En levaduras y otros organismos eucariotas hay dos recombinasas requeridas para reparar esas roturas. La proteína RAD51 es requerida para la recombinación mitótica y meiótica y la proteína DMC1 es específica de la recombinación meiótica.

Referencias: 

- http://www.ivu.org/spanish/trans/ssnv-genetic.html

- https://es.scribd.com/doc/70708591/Recombinacion-genetica

- https://blogger.googleusercontent.com/img/b/R29vZ2xl/AVvXsEiKevq2gd4geT5tRJ8yLmY3OnNy3wclFPjHsNS1h3oBR84_5WEz7HhTIr4s406M13w0wFT97pFVDQmIcx3jxu6k10vM2W1hhqo3z56PzsF4EHuMiDecJfWC4WcZFBHiAlkpvPjE1bSAi1c/s1600/Imagen2.png

Técnica de Hibridación en Neumonia

Se realizó la prueba OligoDetect®–Mycoplasma pneumoniae (Chemicon), con una mezcla de iniciadores que amplificaron una secuencia de 143 pb del gen ATPasa de M. pneumoniae. Cada reacción tenía un volumen final de 25 µl que contenía una concentración de 200 µM de dATP, dGTP, dTTP y dCTP, 2.5 U de Taq polimerasa, 3 mM de MgCI2, 0.3µM de la mezcla de primers y buffer 1X. Después de una desnaturalización inicial por 1 minuto a 94°C, se realizaron 40 ciclos de desnaturalización por 1 minuto a 94°C, anillaje a 45°C por 30 segundos y elongación a 72°C por 1 minuto. Posteriormente se realizó una extensión final por 8 minutos a 72°C en un ter–mociclador Cycler (Bio–Rad).

La prueba de hibridación in vitro diseñada para detectar la región amplificada del gen de la ATPasa, consistió en una denaturación bajo condiciones alcalinas seguida de una hibridación, cuyos resultados eran determinados mediante la absorbancia de los controles y las muestras.

La aplicación de la técnica molecular usada, PCR–hibridación in vitro, demostró ser de gran utilidad para la detección de M. pneumoniae en hisopados orofaríngeos, ya que la presencia de ácidos nucleicos de M. pneumoniae es frecuente en las muestras respiratorias estudiadas.

Referencia:http://scielo.unam.mx/scielo.php?pid=S0187-75852005000400002&script=sci_arttext

Detección de Mycoplasma pneumoniae mediante PCR–hibridación in vitro

T: Detección de Mycoplasma pneumoniae mediante PCR-hibridación in vitro en niños con infección respiratoria.

O: Detección de M. pneumoniae en hisopados orofaríngeos mediante la técnica de PCR-hibridación in vitro para contribuir a la implementación de estrategias diagnosticas que permitan un mejor conocimiento de la situación real de las infecciones respiratorias causadas por él, y el establecimiento de pruebas útiles para un diagnostico preciso que permita una terapéutica específica.

M: Exudado orofaríngeo.

AN: ADN bacteriano extraido con el Kit QIAamp® DNA Mini Kit (QIAGEN®)

G: ATPasa de M. pneumoniae.

PCR: PCR-hibridación in vitro.

          D: 40 ciclos por un 1min a 94°.

          H: 72° por 1min.

          E: 45° por 30 segundos en un termociclador Cycler (Bio-Rad).

V: Electroforesis en geles de agarosa al 1.5% teñidos con bromuro de etidio.

C+: Control de amplificación del Kit.

CN: -
C-: Agua bidestilada estéril.

CB: Agua bidestilada estéril.

FP: -

FN: -

S: -

E: -

Referencia: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0187-75852005000400002

Detección por PCR múltiple de gérmenes atípicos en pacientes con neumonía adquirida de la comunidad que concurrieron al INERAM

T: Detección por PCR múltiple de gérmenes atípicos en pacientes con neumonía adquirida de la comunidad que concurrieron al Hospital INERAM.
O: Detectar de forma simultánea, mediante métodos moleculares, M. pneumoniae, C. pneumoniae y L. pneumophila en muestras respiratorias de pacientes con NAC, y describir los gérmenes comunes aislados por métodos microbiológicos convencionales.
M: Esputo y líquidos purulentos
AN: ADN bateriano, extraido mediante el Kit comercial Wizard Genomics, promega, USA.
G: 16S rRNA de, ompA y mip.
PCR: PCR - Multiplex
V: Electroforesis en gel de agarosa al 2% y tinción de bromuro de etidio
C+: ADN de M. pneumoniae, C. pneumoniae, L. pneumophila.
CN: ADN de la cepa ATCC 33152 de L. pneumophila.
C-: -

CB: -

FP: -
FN: -
S: 93 al 100%
E: 98 al 100%

Referencia:

- http://scielo.iics.una.py/scielo.php?pid=S1812-95282012000100004&script=sci_arttext

Epigenética en Neumonía

Epigenética se usa para describir los procesos en que la expresión genética es regulada por mecanismos no genéticos. Estos procesos son parte esencial de la organogénesis y maduración donde los factores no genéticos regulan la cronología de la expresión genética. Los mecanismos epigenéticos participan en la supresión de mutaciones potencialmente dañinas, pueden modificar la expresión genética en respuesta a exposiciones ambientales.

La exposición a contaminación intradomiciliaria más que duplica el riesgo de neumonía. El 36% de infecciones respiratorias bajas a nivel mundial son atribuibles a los combustibles sólidos y el 1% de todas las infecciones respiratorias, a la contaminación atmosférica, son otros contaminantes, especialmente el humo de tabaco.

Referencia: 

- http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0717-73482009000200006

- http://www.cenizadeestrellas.com/2012/10/la-epigenetica-y-el-resurgir-del.html

Alteraciones en la Traduccion

Streptococcus pneumoniae es uno de los microorganismo cuyo principal mecanismo de resistencia a los B-lactámicos es debido a la presencia de PBP modificadas. No se han descrito B-lactamasas en Steptococcus penumoniae. Hasta el momento, se han descrito 5 PBP diferentes de alto peso molecular (1a, 1b, 2x, 2a, 2b) y una de bajo peso molecular (PBB3). Las modificaciones en las PBP pueden ser debidas a la recombinación genética que da lugar a genes mosaico, o debidas a mutaciones puntuales en los genes que codifican para las PBP.

Referencia:
- http://www.tdx.cat/bitstream/handle/10803/2419/02.JMSO_ARTICLE_I.pdf;jsessionid=FB337955C329A4375040A853930665CC.tdx2?sequence=2
- http://timbinortatanonymousbiologist.blogspot.com/2012_05_01_archive.html

Alteraciones en la Transcripcion

La Klebsiella Pneumoniae es un patógeno humano causante de neumonias que constituyen un problema sanitario mundial por su resistencia a muchos antibioticos, segun la OMS.

Los científicos han detectado la presencia de polimixinas mediante tres receptores de superficie, y la activacion de estos desencadena un cambio en la trasncripcion de nuemrosos genes implicados en remodelar la superficie de la bateria. Se han descubierto las bases moleculares del proceso y se ha encontrado que la bacteria incrementa la expresión de la cápsula y cambia la estructura de su lipopolisacarido.

Referencia:

• http://www.infosalus.com/salud-bienestar/noticia-descubren-bacteria-causante-neumonias-resiste-ultimo-antibiotico-desarrollado-tratamiento-20110905120756.html
• http://www.iesbinefar.es/quilez/mod/resource/view.php?id=765

Alteraciones en la Replicación

La replicación del virus de la neumonía (coronavirus) posee ciertas características peculiares que favorecen una alta tasa de mutación y en particular la recombinación genética. La polimerasa viral (enzima responsable de copiar el ARN para producir nuevos ARNs que formarán parte del genoma de la progenie viral) tiene la habilidad de transcribir en forma discontinua el ARN genómico 2. Esto favorece un fenómeno denominado recombinación genética, a partir del cual surgen genomas quiméricos compuestos por dos genomas de virus distintos. De esta forma, estos virus quiméricos podrían poseer un tropismo nuevo e infectar una nueva especie, por ejemplo el hombre.

Referencia:

• http://www.ivic.gob.ve/bis/bis115/Page3.htm
• http://vitae.ucv.ve/pdfs/VITAE_3499.pdf

Pruebas de Screening y Confimatoria de Neumonia

Pruebas de screening de neumonia

La confirmación de neumonia se basa en el diagnostico clínico, según los síntomas y signos que tenga el paciente. El diagnostico de confirmación se lo hace mediante:

• Pruebas de laboratorio:
• Análisis de sangre y orina, niveles de oxigeno en sangre (para determinar el antigeno).
• Radiologia torácica (es la clave para el diaqgnostico).

Pruebas confirmatorias de neumonia

• Otras técnica no invasivas: Recoleccion de esputo (moco que aparece en la tos), con el fin de identificar la causa del problema mediante cultivos.

• Técnicas invasivas: En caso de casos graves.
• Toracocentesis: Punción de la pared torácica, para extraer muestas de líquido del púlmon.
• Broncoscopia: Sondaje por la via aerea superior para llegar al bronquio y recolectar muestras para ser analizadas.

Referencia: http://www.webconsultas.com/neumonia/diagnostico-de-una-neumonia-646

Neumonía

Es una inflamación del pulmón, causada generalmente por una infección pero también existen algunas causas comunes como son bacterias, virus o parásitos. Los pulmones están formados por pequeños sacos, llamados alvéolos, que en las personas sanas se llenan de aire al respirar, pero los alvéolos de los enfermos de neumonía están llenos de pus y líquido, lo que hace dolorosa la respiración y limita la absorción de oxígeno. La neumonía es la principal causa individual de mortalidad infantil en todo el mundo. Si padece de neumonía, puede presentar dificultades para respirar e incluso dolor en el pecho, tener tos y fiebre.

Referencia:

• http://vsearch.nlm.nih.gov/vivisimo/cgi-bin/query-meta?v%3Aproject=medlineplus-spanish&query=neumonia&x=0&y=0
• http://www.taringa.net/posts/salud-bienestar/16143502/Neumonia-Pulmonia.html

Bienvenidos!!!

Bienvenida

La creación de este blog tiene como objetivo final compartir el conocimiento que estoy adquiriendo, para ayudarles con sus tareas, expociociones, en si con lo que este a mi alcance. Soy estudiante de medicina y espero la informacón que les doy sea de su agrado y les sirva mucho para aclarar sus dudas.

Bienvenidos a este blog de Biologia Molecular!!!!...